| Titre : |
Recherche de levures productrices d’enzymes glycolytiques exocellulaires thermostables : Production (sur boite de Pétri eten batch) et Caractérisation des enzymes produites. |
| Type de document : |
texte imprimé |
| Auteurs : |
Nadine Sofia Dali, Auteur ; Afaf Hamame, Auteur ; Z Meraihi, Directeur de thèse ; S Dakhmouche, Auteur |
| Editeur : |
CONSTANTINE [ALGERIE] : Université Frères Mentouri Constantine |
| Année de publication : |
2016 |
| Importance : |
102 f. |
| Format : |
30 cm. |
| Note générale : |
Une copie electronique PDF disponible en BUC |
| Langues : |
Français (fre) |
| Catégories : |
Biologie:Biochimie et Biologie Cellulaire et Moléculaire
|
| Tags : |
levure Clavispora lusitaniae α-amylase maltase thermostabilité écosystèmes arides Biochimie / Analyse Protéomique et Santé. |
| Index. décimale : |
730 Biochimie et biologie cellulaire |
| Résumé : |
L’objectif principal de cette étude est la sélection de levures productrices de deux enzymes
thermostables. Un screening portant sur 02 souches de levures est réalisé sur milieu solide (Boite de
Pétri) pour la mise en évidence de 05 enzymes : α-amylase, maltase, pectinase, cellulase et protéase.
Les deux souches testées : L5 et L10 (isolées d’écosystèmes arides, région de Biskra, Sud Algérien)
sont cultivées sur un milieu à base de substrat inductible pour chaque enzyme. Ces milieux solides
sont incubés dans une gamme de température allant de 40°C à 50°C. Après plusieurs jours de culture,
les levures ont montré une bonne croissance et ont produit 02 enzymes amyllolytiques (α-amylase et
maltase dans l’intervalle de température 40 – 45°C) et la pectinase à 47 °C pour la L5. Cependant, la
souche L5 s’avère plus performante. D’après l’identification faite par le laboratoire, la souche L5
s’apparente à la levure Clavispora lusitaniae. La souche est ensuite cultivée en batch sur un milieu
à base de lactosérum acide à 100% (déprotéiné, enrichi et supplémenté de substrats inducteur pour l’
α-amylase et la maltase) pour suivre la cinétique d’excrétion des deux enzymes dans les conditions
suivantes : 50 ml de milieu de lactosérum déprotéiné, ajusté à pH 5, mis en Erlen-Meyers de 250 ml
et incubé à 40° C et sous une agitation 100 rpm. Les résultats montrent que les deux enzymes ne sont
pas synthétisées en même temps : 24 heures pour l’α-amylase à 1545.85 U et 60 heures pour la
maltase à 144.8 U. Ce résultat indique que les deux enzymes ne sont pas associées en un complexe
binaire. Cette hypothèse doit être vérifiée par l’électrophorèse PAGE et SDS PAGE. L’étude des
effets du pH et de la température sur les deux enzymes révèle que l’α-amylase produite par
Clavispora lusitaniae est active dans un intervalle de pH de 5 - 6.5 et dans un intervalle de
température de 65 - 80°C, avec des optimums respectifs à pH 6 et à 70° C. Quand à la maltase, elle
est active dans une plage de pH de 4.5 - 6 et de température de 75 - 90°C, avec des optimums
respectifs à pH 5 et à 80°C. Les deux enzymes amyllolytiques ont subi un traitement thermique
pendant 120min à différentes températures : 70, 80,90 et 100°C. A 80°C, les demi-vies sont
supérieures à 120min pour les deux enzymes. A 100°C, l’α-amylase a une demi-vie de 120min et la
maltase possède une stabilité moindre, avec une demi-vie de 90min. L’α-amylase de Clavispora
lusitaniae semble donc être plus stable que la maltase produite par la même souche. Avec ces
quantités appréciables d’enzymes et ces propriétés physico-chimiques exceptionnelles, l’α-amylase et
la maltase de la levure Clavispora lusitaniae peuvent être utilisés en industries pharmaceutique ou
autres après leur purification et leur immobilisation pour les rendre encore plus stables et les recycler
en fin de processus. |
| Diplome : |
Master 2 |
| Permalink : |
https://bu.umc.edu.dz/master/index.php?lvl=notice_display&id=4099 |
Recherche de levures productrices d’enzymes glycolytiques exocellulaires thermostables : Production (sur boite de Pétri eten batch) et Caractérisation des enzymes produites. [texte imprimé] / Nadine Sofia Dali, Auteur ; Afaf Hamame, Auteur ; Z Meraihi, Directeur de thèse ; S Dakhmouche, Auteur . - CONSTANTINE [ALGERIE] : Université Frères Mentouri Constantine, 2016 . - 102 f. ; 30 cm. Une copie electronique PDF disponible en BUC Langues : Français ( fre)
| Catégories : |
Biologie:Biochimie et Biologie Cellulaire et Moléculaire
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| Tags : |
levure Clavispora lusitaniae α-amylase maltase thermostabilité écosystèmes arides Biochimie / Analyse Protéomique et Santé. |
| Index. décimale : |
730 Biochimie et biologie cellulaire |
| Résumé : |
L’objectif principal de cette étude est la sélection de levures productrices de deux enzymes
thermostables. Un screening portant sur 02 souches de levures est réalisé sur milieu solide (Boite de
Pétri) pour la mise en évidence de 05 enzymes : α-amylase, maltase, pectinase, cellulase et protéase.
Les deux souches testées : L5 et L10 (isolées d’écosystèmes arides, région de Biskra, Sud Algérien)
sont cultivées sur un milieu à base de substrat inductible pour chaque enzyme. Ces milieux solides
sont incubés dans une gamme de température allant de 40°C à 50°C. Après plusieurs jours de culture,
les levures ont montré une bonne croissance et ont produit 02 enzymes amyllolytiques (α-amylase et
maltase dans l’intervalle de température 40 – 45°C) et la pectinase à 47 °C pour la L5. Cependant, la
souche L5 s’avère plus performante. D’après l’identification faite par le laboratoire, la souche L5
s’apparente à la levure Clavispora lusitaniae. La souche est ensuite cultivée en batch sur un milieu
à base de lactosérum acide à 100% (déprotéiné, enrichi et supplémenté de substrats inducteur pour l’
α-amylase et la maltase) pour suivre la cinétique d’excrétion des deux enzymes dans les conditions
suivantes : 50 ml de milieu de lactosérum déprotéiné, ajusté à pH 5, mis en Erlen-Meyers de 250 ml
et incubé à 40° C et sous une agitation 100 rpm. Les résultats montrent que les deux enzymes ne sont
pas synthétisées en même temps : 24 heures pour l’α-amylase à 1545.85 U et 60 heures pour la
maltase à 144.8 U. Ce résultat indique que les deux enzymes ne sont pas associées en un complexe
binaire. Cette hypothèse doit être vérifiée par l’électrophorèse PAGE et SDS PAGE. L’étude des
effets du pH et de la température sur les deux enzymes révèle que l’α-amylase produite par
Clavispora lusitaniae est active dans un intervalle de pH de 5 - 6.5 et dans un intervalle de
température de 65 - 80°C, avec des optimums respectifs à pH 6 et à 70° C. Quand à la maltase, elle
est active dans une plage de pH de 4.5 - 6 et de température de 75 - 90°C, avec des optimums
respectifs à pH 5 et à 80°C. Les deux enzymes amyllolytiques ont subi un traitement thermique
pendant 120min à différentes températures : 70, 80,90 et 100°C. A 80°C, les demi-vies sont
supérieures à 120min pour les deux enzymes. A 100°C, l’α-amylase a une demi-vie de 120min et la
maltase possède une stabilité moindre, avec une demi-vie de 90min. L’α-amylase de Clavispora
lusitaniae semble donc être plus stable que la maltase produite par la même souche. Avec ces
quantités appréciables d’enzymes et ces propriétés physico-chimiques exceptionnelles, l’α-amylase et
la maltase de la levure Clavispora lusitaniae peuvent être utilisés en industries pharmaceutique ou
autres après leur purification et leur immobilisation pour les rendre encore plus stables et les recycler
en fin de processus. |
| Diplome : |
Master 2 |
| Permalink : |
https://bu.umc.edu.dz/master/index.php?lvl=notice_display&id=4099 |
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