Titre :	Extraction, purification par système TPP et caractérisation d’une protéase de Noyaux de dattes.
Type de document :	texte imprimé
Auteurs :	Zahra Djouama, Auteur ; Asma Boubertakh, Auteur ; K Hafid, Directeur de thèse
Editeur :	CONSTANTINE [ALGERIE] : Université Frères Mentouri Constantine
Année de publication :	2021
Importance :	98 f.
Format :	30 cm.
Note générale :	Une copie electronique PDF disponible au BUC
Langues :	Français (fre)
Catégories :	Nutrition, Alimentation et Techniques Agro-alimentaires
Tags :	Extraction, Noyaux de dattes, Protéase, purification, Système TPP,Technologies Agro-alimentaires.
Index. décimale :	230 Biotechnologie Alimentaire
Résumé :	L’objectif de cette étude est centré sur l’extraction, la purification et la caractérisation d’une nouvelle protéase à partir de noyaux de datte variété « ghares ». L’extrait brut de noyaux de dattes récupéré après extraction a été purifié avec le système de répartition trois phasique en étudiant les facteurs qui affectent l'efficacité de la purification qui sont la saturation en (NH4)2SO4, le rapport extrait brut/t-butanol, le pH et la température. Ensuite de la purification on a réalisé une analyse électrophorèse Tricine SDS pour vérifier le résultat de purification. Notre protéase a été ainsi caractérisée par ses paramètres optimaux (pH, température, ions métallique, inhibiteurs, concentration de cacl2, durée de stockage, concentration en substrat et demi-vie de l’enzyme). Nos résultats montrent que les paramètres de purification optimaux étaient une saturation de 20 % (NH4)2SO4, un rapport de 1,0:0,5 d'extrait brut/t-butanol, pH 8 à une température de 30°C, ce qui a donné 2,06 fois de pureté avec un rendement de 164% de notre protéase qui a une tendance de se concentrer dans la phase aqueuse du système TPP. L'enzyme a montré une bande unique proéminente sur SDS-PAGE. C'est une protéine monomère sa poids moléculaire est dans l’ordre de 200 kDa. L’activité protéolytique maximale de notre protéase a été détectée à une température égale à 100°C, pH 4, une concentration du CaCl2 égale à 2,5 mM. L'enzyme s'est avérée hautement stable contre de nombreux ions métalliques et son activité a été renforcée par le K+ et le Na+. Elle était partiellement inhibée par des ions de métaux lourds tels que Cu2+ et le Fe2+. Plusieurs inhibiteurs diminué l’activité enzymatique de notre protéase telle que le BME, le SDS et l’EDTA avec des faibles pourcentages (10%, 18% et 16%, respectivement), cependant l’I2 et le PMSF ont conservé cette activité. Les constantes de Michaelis pour notre protéase ont été dans l’ordre de 5,62Umin pour le Vmax et 0,10 mg/ml pour le Km et leur demi vie été maximale à température 70°C et à concentration 10mM de CaCl2 et minimale à température 30°C et à concentration 2,5mM de Cacl2. Grâce aux propriétés enzymatiques particulières de cette enzyme (activité enzymatique dans une large gamme de températures et de pH ; stabilité aux ions métallique et inhibiteurs), elle est considéré comme un bon candidat pour l’attendrissage de la viande et la fabrication des fromages.
Diplome :	Master 2
Permalink :	https://bu.umc.edu.dz/master/index.php?lvl=notice_display&id=16159

Extraction, purification par système TPP et caractérisation d’une protéase de Noyaux de dattes. [texte imprimé] / Zahra Djouama, Auteur ; Asma Boubertakh, Auteur ; K Hafid, Directeur de thèse . - CONSTANTINE [ALGERIE] : Université Frères Mentouri Constantine, 2021 . - 98 f. ; 30 cm.
Une copie electronique PDF disponible au BUC
Langues : Français (fre)

Catégories :	Nutrition, Alimentation et Techniques Agro-alimentaires
Tags :	Extraction, Noyaux de dattes, Protéase, purification, Système TPP,Technologies Agro-alimentaires.
Index. décimale :	230 Biotechnologie Alimentaire
Résumé :	L’objectif de cette étude est centré sur l’extraction, la purification et la caractérisation d’une nouvelle protéase à partir de noyaux de datte variété « ghares ». L’extrait brut de noyaux de dattes récupéré après extraction a été purifié avec le système de répartition trois phasique en étudiant les facteurs qui affectent l'efficacité de la purification qui sont la saturation en (NH4)2SO4, le rapport extrait brut/t-butanol, le pH et la température. Ensuite de la purification on a réalisé une analyse électrophorèse Tricine SDS pour vérifier le résultat de purification. Notre protéase a été ainsi caractérisée par ses paramètres optimaux (pH, température, ions métallique, inhibiteurs, concentration de cacl2, durée de stockage, concentration en substrat et demi-vie de l’enzyme). Nos résultats montrent que les paramètres de purification optimaux étaient une saturation de 20 % (NH4)2SO4, un rapport de 1,0:0,5 d'extrait brut/t-butanol, pH 8 à une température de 30°C, ce qui a donné 2,06 fois de pureté avec un rendement de 164% de notre protéase qui a une tendance de se concentrer dans la phase aqueuse du système TPP. L'enzyme a montré une bande unique proéminente sur SDS-PAGE. C'est une protéine monomère sa poids moléculaire est dans l’ordre de 200 kDa. L’activité protéolytique maximale de notre protéase a été détectée à une température égale à 100°C, pH 4, une concentration du CaCl2 égale à 2,5 mM. L'enzyme s'est avérée hautement stable contre de nombreux ions métalliques et son activité a été renforcée par le K+ et le Na+. Elle était partiellement inhibée par des ions de métaux lourds tels que Cu2+ et le Fe2+. Plusieurs inhibiteurs diminué l’activité enzymatique de notre protéase telle que le BME, le SDS et l’EDTA avec des faibles pourcentages (10%, 18% et 16%, respectivement), cependant l’I2 et le PMSF ont conservé cette activité. Les constantes de Michaelis pour notre protéase ont été dans l’ordre de 5,62Umin pour le Vmax et 0,10 mg/ml pour le Km et leur demi vie été maximale à température 70°C et à concentration 10mM de CaCl2 et minimale à température 30°C et à concentration 2,5mM de Cacl2. Grâce aux propriétés enzymatiques particulières de cette enzyme (activité enzymatique dans une large gamme de températures et de pH ; stabilité aux ions métallique et inhibiteurs), elle est considéré comme un bon candidat pour l’attendrissage de la viande et la fabrication des fromages.
Diplome :	Master 2
Permalink :	https://bu.umc.edu.dz/master/index.php?lvl=notice_display&id=16159